问题:革兰氏染色时,初染前能加碘液吗?乙醇脱色后复染前,革兰氏阳性菌和氏阴性菌就分别是什么颜色?请知道的牛人们支个招!
答案:↓↓↓ 荆贞的回答: 网友采纳 不可以.因为革兰氏碘液(媒染剂)的作用是增加结晶紫染料和细胞之间的亲和性或附着力,即以某种方式帮助染料固定在细胞上,使不易脱落.改变顺序可能会对效果有影响,所以最好按步骤做. 脱色后复染前,理论上革兰氏阳性菌呈紫色,阴性菌无色.复染的目的就是增加无色阴性菌与背景的反差,以便区别于紫色的阳性菌 革兰氏阳性菌细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔障缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上.呈紫色. 革兰氏阴性菌肽聚糖层薄,交联松散,乙醇脱色不能使其结构收缩,其脂含量高,乙醇将脂溶解,缝隙加大,结晶紫-碘复合物溶出细胞壁,番红复染后呈红色. 革兰氏染色步骤: 1.涂片,火焰固定 2.结晶紫1min,使菌体着上紫色 3.水洗 4.碘液1min,碘和结晶紫形成脂溶性大分子复合物,分子大,能被细胞壁阻留在细胞内 5.水洗 6.酒精脱色30s,细胞壁成分和构造不同,出现不同的反应. 7.水洗 8.番红复染1min,增加脱色菌与背景的反差并区别于未脱色菌. 9.以吸水纸吸干,油镜观察 |