※题型：单选题※知识点：单选题※试题难度：容易
用
Xho
Ⅰ和
Sal
Ⅰ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段,酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是( )
A.图1中两种酶识别的核苷酸序列不同
B.图2中酶切产物可用于构建重组DNA
C.泳道①中是用
Sal
Ⅰ处理得到的酶切产物
D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA
您是尊贵的VIP会员，免费查看答案答案  解析 
※题型：单选题※知识点：单选题※试题难度：较易
下列生物技术操作对遗传物质的改造,会遗传给子代的是( )
A.将胰岛素基因表达质粒转入大肠杆菌,筛选获得基因工程菌
B.将花青素代谢基因导入植物体细胞,经组培获得花色变异植株
C.将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵,培育出产低乳糖牛乳的奶牛
D.将腺苷酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者,进行基因治疗
您是尊贵的VIP会员，免费查看答案答案  解析 
※题型：填空题※知识点：填空题※试题难度：中等
水稻胚乳中含直链淀粉和支链淀粉,直链淀粉所占比例越小糯性越强。科研人员将能表达出基因编辑系统的
DNA
序列转入水稻,实现了对直链淀粉合成酶基因(
Wx
基因)启动子序列的定点编辑,从而获得了
个突变品系。
1.将能表达出基因编辑系统的DNA序列插入Ti质粒构建重组载体时,所需的酶是,重组载体进入水稻细胞并在细胞内维持稳定和表达的过程称为。
2.根据启动子的作用推测,Wx基因启动子序列的改变影响了,从而改变了Wx基因的转录水平。与野生型水稻相比,3个突变品系中Wx基因控制合成的直链淀粉合成酶的氨基酸序列(填“发生”或“不发生”)改变,原因是。
3.为检测启动子变化对Wx基因表达的影响,科研人员需要检测Wx基因转录产生的mRNA(WxmRNA)的量。检测时分别提取各品系胚乳中的总RNA,经________过程获得总cDNA。通过PCR技术可在总cDNA中专一性的扩增出Wx基因的cDNA,原因是________________________。
4.各品系WxmRNA量的检测结果如图所示,据图推测糯性最强的品系为________,原因是________________________。
您是尊贵的VIP会员，免费查看答案答案  解析 
※题型：读图填空题※知识点：读图填空题※试题难度：中等
W
是一种具有特定
功能的人体蛋白质。某研究小组拟仿照制备乳腺生物反应器的研究思路,制备一种膀胱生物反应器来得
W
基本过程如图所示。
回答下列问题
:
1.步骤①中需要使用的工具酶有。步骤②和③所代表的操作分别是和。步骤④称为。
2.与乳腺生物反应器相比,用膀胱生物反应器生产W的优势在于不受转基因动物的(答出2点即可)的限制。
3.一般来说,在同一动物个体中,乳腺上皮细胞与膀胱上皮细胞的细胞核中染色体DNA所含的遗传信息(填“相同”或“不同”),原因是。
4.从上述流程可知,制备生物反应器涉及胚胎工程,胚胎工程中所用到的主要技术有(答出2点即可)。
您是尊贵的VIP会员，免费查看答案答案  解析 
※题型：填空题※知识点：填空题※试题难度：中等
基因工程中可以通过
PCR
技术扩增目的基因。回答下列问题。
1.基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。
2.生物体细胞内的DNA复制开始时,解开DNA双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时,使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。
3.目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是________________。
您是尊贵的VIP会员，免费查看答案答案  解析 
※题型：填空题※知识点：填空题※试题难度：中等
回答下列问题。
1.博耶(H.Boyer)和科恩(S.Cohen)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达。该研究除证明了质粒可以作为载体外,还证明了(答出两点即可)。
2.体外重组的质粒可通过Ca2+参与的方法导入大肠杆菌细胞,而体外重组的噬菌体DNA通常需与组装成完整噬菌体后,才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞。在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中,可作为重组噬菌体宿主细胞的是。
3.真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解,在实验中应选用的大肠杆菌作为受体细胞,在蛋白质纯化的过程中应添加的抑制剂。
您是尊贵的VIP会员，免费查看答案答案  解析 
※题型：读图填空题※知识点：读图填空题※试题难度：中等
图
是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图,载体质粒
P0
具有四环素抗性基因(
tet
r
)和氨
苄
青霉素抗性基因(
amp
r
)。请回答下列问题:
1.EcoRV酶切位点为
,EcoRV酶切出来的线性载体P1为末端。
2.用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段,其两端各自带有一个腺嘌呤脱氧核苷酸。载体P1用酶处理,在两端各添加了一个碱基为的脱氧核苷酸,形成P2;P2和目的基因片段在酶作用下,形成重组质粒P3。
3.
为筛选出含有重组质粒
P3
的菌落,采用含有不同抗生素的平板进行筛选,得到
A
、
B
、
C
三类菌落,其生长情况如下表(“
+
”代表生长,“
-
”代表不生长)。根据表中结果判断,应选择的菌落是
(填表中字母)类,另外两类菌落质粒导入情况分别是
、
|
A
B
C
无抗生素
+
+
+
氢
苄
青霉素
+
+
-
四环素
+
-
-
氨
苄
青霉素
+
四环素
+
-
-
4.为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒,拟设计引物进行PCR鉴定。图2所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置,PCR鉴定时应选择的一对引物是。某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400bp片段,原因是。
您是尊贵的VIP会员，免费查看答案答案  解析 
※题型：读图填空题※知识点：读图填空题※试题难度：中等
如果已知
一
小段
DNA
的序列,可采用
PCR
的方法,简捷地分析出已知序列两侧的序列,具体流程如图(以
Eco
R
Ⅰ酶切
为例):
请据图
回答问题:
1.步骤Ⅰ用的EcoRⅠ是一种酶,它通过识别特定的切割特定位点。
2.步骤Ⅱ用的DNA连接酶催化相邻核苷酸之间的3′-羟基与5′-磷酸间形成;PCR循环中,升温到95℃是为了获得;TaqDNA聚合酶的作用是催化。
3.
若如表所列为已知的
DNA
序列和设计的一些
PCR
引物,步骤Ⅲ选用的
PCR
引物必须是
(从引物①②③④中选择,填编号)。
DNA
序列(虚线处省略了部分核苷酸序列)
已知序列
P
CR
引物
①
′
-AACTATGCGCTCATGA-3
′
②
′
-GCAATGCGTAGCCTCT-3
′
③
′
-AGAGGCTACGCATTGC-3
′
④
′
-TCATGAGCGCATAGTT-3
′
4.对PCR产物测序,经分析得到了片段F的完整序列。下列DNA单链序列中(虚线处省略了部分核苷酸序列),结果正确的是______。
A.
B.
C.
D.
您是尊贵的VIP会员，免费查看答案答案  解析 
※题型：读图填空题※知识点：读图填空题※试题难度：中等
某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光,这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(
L
1)基因连接在GFP基因的5′末端,获得了
L
1-
GFP
融合基因(简称为甲),并将其插入质粒P0,构建了真核表达载体P1,其部分结构和酶切位点的示意图如下,图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。
回答下列问题:
1.据图推断,该团队在将甲插入质粒P0时,使用了两种限制酶,这两种酶是。使用这两种酶进行酶切是为了保证,也是为了保证。
2.将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后,若在该细胞中观察到了绿色荧光,则说明
L
1
基因在牛的皮肤细胞中完成了和过程。
3.为了获得含有甲的牛,该团队需要做的工作包括:将能够产生绿色荧光细胞的移入牛的中、体外培养、胚胎移植等。
4.为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中,某同学用PCR方法进行鉴定,在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的(填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”)作为PCR模板。
您是尊贵的VIP会员，免费查看答案答案  解析 
※题型：读图填空题※知识点：读图填空题※试题难度：较难
为生产具有特定性能的
α-
淀粉酶
研究人员从某种海洋细菌中克隆了
α-
淀粉酶基因
(1
656
个碱基对
)
利用基因工程大量制备
α-
淀粉酶
实验流程
如
图。请回答下列问题
:
1.利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前,需先获得细菌的。
2.为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接,需在引物的端加上限制性酶切位点,且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点,主要目的是。
3.进行扩增时,反应的温度和时间需根据具体情况进行设定,下列选项中的设定与引物有关,的设定与扩增片段的长度有关。(填序号)
①变性温度 ②退火温度 ③延伸温度④变性时间 ⑤退火时间 ⑥延伸时间4.
如
图表示筛选获得的工程菌中编码
α-
淀粉酶的
mRNA
的部分碱基序列
:
图中虚线框内
mRNA
片段包含
个
密码子
如虚线框后的序列未知
预测虚线框后的第一个密码子最多有
种。
5.
获得工程
菌
表达的
α-
淀粉酶后
为探究影响酶活性的因素
以浓度为
1%
的可溶性淀粉为底物测定酶活性
结果如
下
:
缓冲液
mmol
/LNa
HPO
–
KH
PO
mmol
/LTris
–
HCl
mmol
/L
Gly
–
NaOH
pH
6.0
6.5
7.0
7.5
7.5
8.0
8.5
9.0
9.0
9.5
10.0
10.5
酶
相对
活性
%
25.4
40.2
49.8
63.2
70.1
95.5
99.5
85.3
68.1
63.7
41.5
20.8
根据上述实验结果
初步判断该
α-
淀粉酶活性最高的条件为
您是尊贵的VIP会员，免费查看答案答案  解析 
※题型：填空题※知识点：填空题※试题难度：中等
甲型流感病毒为
RNA
病毒
易引起流感大规模流行。我国科学家在
2017
年发明了一种制备该病毒活疫苗的新方法
主要环节如下。
1.改造病毒的部分基因,使其失去在正常宿主细胞内的增殖能力。以病毒RNA为模板,逆转录成对应DNA后,利用技术扩增,并将其中某些基因(不包括表面抗原基因)内个别编码氨基酸的序列替换成编码终止密码子的序列。与改造前的基因相比,改造后的基因表达时不能合成完整长度的,因此不能产生子代病毒。将该改造基因、表面抗原等其他基因分别构建重组质粒,并保存。
2.构建适合改造病毒增殖的转基因宿主细胞。设计合成一种特殊tRNA的基因,其产物的反密码子能与1中的终止密码子配对结合,并可携带一个非天然氨基酸(Uaa)。将该基因与连接后导入宿主细胞。提取宿主细胞的进行分子杂交鉴定,筛选获得成功表达上述tRNA的转基因宿主细胞。
3.利用转基因宿主细胞制备疫苗。将1中的重组质粒导入2中的转基因宿主细胞,并在补加的培养基中进行培养,则该宿主细胞能利用上述特殊tRNA,翻译出改造病毒基因的完整蛋白,产生大量子代病毒,用于制备疫苗。特殊tRNA基因转录时,识别其启动子的酶是(单选)。A.病毒的DNA聚合酶B.宿主的DNA聚合酶C.病毒的RNA聚合酶D.宿主的RNA聚合酶4.上述子代病毒不能在正常宿主细胞中增殖,没有致病性,因此不经灭活或减毒即可制成疫苗。与不具侵染性的流感病毒灭活疫苗相比,该病毒活疫苗的优势之一是可引起免疫,增强免疫保护效果。
您是尊贵的VIP会员，免费查看答案答案  解析 
|
