※题型：单选题※知识点：单选题※试题难度：较难
限制性核酸内切酶HindⅢ和XhoⅠ的识别序列及切割位点分别为A↓AGCTT和C↓TCGAG,下列相关叙述正确的是( )
A.两种限制酶可在同一种生物中分离出来
B.两种限制酶切割DNA形成的黏性末端的碱基序列都是AGCT
C.用HindⅢ酶切割含目的基因的DNA片段和用XhoⅠ酶切割质粒后,目的基因和质粒能连接成重组质粒
D.实验中可通过控制反应时间、酶的浓度等控制酶切效果
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※题型：单选题※知识点：单选题※试题难度：中等
对下图所示粘性末端的说法错误的是( )
A.DNA连接酶作用位点在b处,催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键
B.甲、乙具相同的粘性末端可形成重组DNA分子,但甲、丙之间不能
C.甲、乙、丙粘性末端是由各自不同的限制性核酸内切酶催化产生的
D.切割甲的限制性核酸内切酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子
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※题型：多选题※知识点：多选题※试题难度：较易
科研人员利用农杆菌转化法将抗病毒蛋白基因C导入番木瓜,培育出转基因抗病番木瓜,Ti质粒如图所示。下列叙述正确的是( )
A.农杆菌的拟核DNA与番木瓜基因发生重组
B.构建重组质粒需要限制酶和DNA连接酶
C.含重组Ti质粒的农杆菌具有四环素抗性
D.转基因抗病番木瓜不具有卡那霉素抗性
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※题型：单选题※知识点：单选题※试题难度：中等
下列有关基因工程基本操作程序的叙述,正确的是( )
A.基因工程的第二步不涉及碱基互补配对原则
B.人们常用转化法将目的基因导入大肠杆菌细胞
C.常用分裂能力较强的动物细胞作为基因工程的受体细胞
D.若从转基因生物中提取的mRNA可与目的基因形成杂交带,说明该目的基因已表达
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※题型：单选题※知识点：单选题※试题难度：中等
研究者将含有乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因的DNA片段分别制成探针,与从转基因奶牛的乳腺细胞、口腔上皮细胞、蹄部细胞中提取的mRNA分别进行杂交,结果如表所示。下列叙述正确的是( )
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探针
乳腺细胞
口腔上皮细胞
蹄部细胞
乳铁蛋白肽基因探针
出现杂交带
未现杂交带
未现杂交带
人干扰素基因探针
出现杂交带
出现杂交带
出现杂交带
A.乳铁蛋白肽基因可在转基因奶牛的多种体细胞中表达
B.人干扰素基因可在转基因奶牛的多种体细胞中表达
C.表中两种基因探针所含的脱氧核苷酸序列相同
D.乳铁蛋白肽基因和人干扰素基因都是mRNA片段
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※题型：单选题※知识点：单选题※试题难度：较易
采用基因工程技术培育转基因羊作为乳腺生物反应器,使其能合成人凝血因子且只存在于乳汁中。下列有关叙述,不正确的是( )
A.将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控元件重组在一起构建成基因表达载体
B.将含有人凝血因子基因的表达载体导入羊乳腺细胞中即可获得乳腺生物反应器
C.该转基因羊产生的生殖细胞中可能会含有人凝血因子基因
D.与乳腺生物反应器相比,膀胱生物反应器不受性别等限制,受体来源更广泛
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※题型：单选题※知识点：单选题※试题难度：中等
下列关于蛋白质工程应用的叙述正确的是( )
A.基因工程药物与天然产物一般相同,蛋白质工程药物与天然产物可能不相同
B.蛋白质工程和基因工程的目的都是获得人类需要的蛋白质,所以二者没有区别
C.只有利用蛋白质工程才可以在大肠杆菌细胞中得到人的胰岛素
D.当得到可以在-70℃条件下保存半年的干扰素后,在相关酶、氨基酸和适宜的温度、pH条件下,干扰素可以大量自我合成
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※题型：单选题※知识点：单选题※试题难度：中等
下列实践活动包含基因工程技术的是( )
A.抗虫小麦与矮秆小麦杂交,获得抗虫矮秆小麦
B.水稻F1花药经培养和染色体加倍,获得基因型纯合新品种
C.将含抗病基因的重组DNA导入玉米细胞,经组织培养获得抗病植株
D.用射线照射大豆使其基因结构发生改变,获得种子性状发生变异的大豆
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※题型：单选题※知识点：单选题※试题难度：较易
下列关于基因工程技术的说法,正确的是( )
A.基因工程中,天然质粒可以直接被用作载体
B.载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达
C.目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能表达
D.人胃蛋白酶基因在大肠杆菌中表达,产生的胃蛋白酶具有生物活性
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※题型：填空题※知识点：填空题※试题难度：中等
CRISPR/
Cas9
是近年来颇受关注的一种基因编辑系统。该系统主要包含引导
RNA
和
Cas9
蛋白两个部分,引导
RNA
能识别并与特定的
DNA
序列结合,从而引导
C
a
s9
蛋白结合到相应位置并剪切
DNA
,最终实现对靶基因序列的编辑。研究人员试图用
CRISPR/Cas9
系统对水稻产量基因(
Q
基因)进行编辑,请回答下列问题:
1.研究发现,CRISPR/Cas9系统在自然界中仅存在于原核生物中,故需借助技术才能在水稻细胞中发挥作用。Cas9蛋白与酶的功能相似。
2.首先依据的部分序列设计DNA片段A(负责编码相应引导RNA),再将片段A与含有Cas9基因的质粒B连接,以构建编辑水稻Q基因的CRISPR/Cas9表达载体(如图所示)。位点Ⅰ、位点Ⅱ分别表示酶切位点。
3.质粒B大小为2.5kb(位点Ⅰ与位点Ⅱ相隔60bp,即60个碱基对),经酶切后的片段A大小为0.5kb,连接形成的表达载体大小为kb。
4.将表达载体导入水稻细胞后,引导RNA与上的靶基因结合,并对其进行编辑,编辑后的基因能够稳定地遗传和表达。
5.CRISPR/Cas9基因编辑技术有时存在“脱靶”现象,编辑了错误的基因,试从引导RNA的角度分析脱靶的原因:。
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※题型：填空题※知识点：填空题※试题难度：中等
黄瓜花叶病毒(CMV)是能侵染多种植物的RNA病毒,可危害番茄的正常生长并造成减产。研究人员通过农杆菌介导将该病毒外壳蛋白的cDNA导入番茄植株中,成功获得抗CMV的番茄植株。据此回答下列问题:1.获得CMV的RNA后,在的催化下才能合成CMV外壳蛋白的cDNA。
2.获得cDNA后,需先通过一定方法将其插入到农杆菌的片段中,然后将番茄子叶切段与该农杆菌共同培养,以实现对番茄细胞的转化。
3.将经共同培养后的番茄外植体接种于含有卡那霉素和青霉素的选择培养基上培养一段时间,只有部分外植体生出愈伤组织。研究人员据此确定这些生出愈伤组织的外植体已成功导入了cDNA,你认为他们作出以上判断的理由是。
4.要想确定转基因番茄已经成功表达出CMV外壳蛋白,需要进行实验。
5.若要验证转基因番茄具有较好的抗CMV能力,请写出实验设计思路:。若转基因番茄自交子代中抗性植株与敏感植株数量之比接近3︰1,由此可以得出的结论是(答出两点)。
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