※题型：单选题※知识点：单选题※试题难度：中等
用PCR技术将DNA分子中的A1片段进行扩增,设计了引物Ⅰ、Ⅱ,其连接部位如图甲所示,X为某限制酶识别序列。扩增后得到的绝大部分DNA片段是图乙中的( )
A.A B.B C.C D.D
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※题型：单选题※知识点：单选题※试题难度：较易
PCR过程中,引物的作用是( )
A.打开DNA双链,使DNA解旋为单链
B.催化合成DNA子链
C.使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始复制
D.为DNA复制过程提供模板
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※题型：单选题※知识点：单选题※试题难度：中等
PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,下列有关PCR过程的叙述,正确的是( )
A.待扩增的DNA两条链的解旋过程需要酶的催化
B.所用引物的长度越短,与模板链结合的特异性越强
C.在子链的形成过程中,dNTP可以提供原料和能量
D.与细胞内DNA复制相比,PCR所需要的酶对高温比较敏感
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※题型：单选题※知识点：单选题※试题难度：较易
下列属于PCR技术的条件的是( )
①单链的脱氧核苷酸序列引物②目的基因所在的DNA片段③脱氧核苷酸④核糖核苷酸⑤DNA连接酶⑥DNA聚合酶⑦限制酶A.①②③⑤ B.①②③⑥ C.①②③⑤⑦ D.①②④⑤⑦
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※题型：单选题※知识点：单选题※试题难度：较易
在PCR扩增DNA的实验中,预计一个DNA分子经过30次循环后,应该得到230个DNA分子,但是结果只有约210个DNA分子,那么出现该现象的原因不可能是( )
A.TaqDNA聚合酶的活力不够或活性受到抑制
B.系统设置欠妥
C.循环次数不够
D.引物不能与模板链结合
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※题型：读图填空题※知识点：读图填空题※试题难度：较易
RT-PCR是将mRNA逆转录(RT)和cDNA的聚合酶链式反应相结合的技术,具体过程如图所示,请回答:
style="VERTICAL-ALIGN:middle">C
在PCR反应体系中还需要加入4种游离的脱氧核苷酸、Taq酶等,不需要解旋酶,而是利用高温引起DNA双链解旋,A错误;第2轮PCK,引物1能与图中②结合但形成的DNA两条链长度不同,B错误;引物中设计两种限制酶识别位点有利于目的基因定向插入运载体,避免发生自身环化,C正确3轮PCR结朿后,含突变碱基对且两条链等长的DNA有2个,占2/8=1/4,D错误。
1.过程①需要加入缓冲液、原料、、和引物A等。
2.过程②首先要将反应体系的温度升高到95℃,其目的是,该反应体系中所用的TaqDNA聚合酶至少应能耐受℃高温。
3.决定RT-PCR扩增片段的是引物,要对图中单链cDNA进行n次循环的扩增,理论上至少需要个引物B。
4.利用RT-PCR技术可对某些微量RNA病毒进行检测,并可提高检测的灵敏度,原因是。
5.RT-PCR过程中主要通过对的控制,影响酶的活性,从而使得化学反应高效有序地进行。
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