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2021届高考生物二轮查缺补漏之选考题题型专练04

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限制酶
EcoR

BamH

Hind

EcoR

识别序列及切割位点
G

AATTC
G

G
ATC
A

AGCTT
CTA

TAG

2.过程③中,pUC18质粒需用限制酶______切割,才能与扩增出的目的基因在______作用下,形成重组质粒。
3.为了便于筛选出含有重组质粒的菌落,需采用含______的平板进行筛选,含重组质粒的菌落应呈______色。提取上述筛选得到的菌落的RNA,通过逆转录获得DNA,再进行PCR扩增检测,若最终未能检测出目的基因,其最可能的原因是______________________________。

※题型:读图填空题※知识点:读图填空题※试题难度:较难
基因定点整合可替换特定基因,该技术可用于单基因遗传病的治疗。苯丙酮尿症是由

PKU
基因突变引起的,将正常
PKU
基因定点整合到
PKU
基因突变的小鼠胚胎干细胞的染色体DNA上,替换突变基因,可用来研究该病的基因治疗过程。定点整合的过程是:从染色体DNA上突变
PKU
基因两侧各选择一段DNA序列HB1和HB2,根据其碱基序列分别合成HB1和HB2,再将两者分别与基因
HSV-tk
1、
HSV-tk
2连接,中间插入正常
PKU
基因和标记基因
neor
,构建出如图所示的重组载体。重组载体和染色体DNA中的HB1和HB2序列发生交换,导致两者之间区域发生互换,如图所示。

1.构建重组载体时,常用的工具酶有。该实验用小鼠胚胎干细胞作为
PKU
基因的受体细胞以培育出转基因小鼠,除了胚胎干细胞能大量增殖外,还因为胚胎干细胞。
2.为获得小鼠的胚胎干细胞,可将小鼠囊胚中的取出,并用处理使其分散成单个细胞进行培养,培养过程中大部分细胞会贴附在培养瓶的内表面生长,这种现象称为。
3.将图中重组载体转入胚胎干细胞时,会出现
PKU
基因错误整合现象。发生错误整合时,载体的两个
HSV-tk
中至少会有一个与
neor
一起整合到染色体DNA上。已知含有
neor
的细胞具有G418的抗性,
HSV-tk
1、
HSV-tk
2的产物都能把DHPG转化成有毒物质而使细胞死亡。转化后的胚胎干细胞依次在含有G418及同时含有G418和DHPG的培养液中进行培养,在双重选择下存活下来的是的胚胎干细胞。理由是。
4.将筛选得到的胚胎干细胞培育成小鼠,从个体生物学水平检测,若小鼠,说明
PKU
基因成功表达。

※题型:读图填空题※知识点:读图填空题※试题难度:中等
乙烯具有促进果实成熟的作用,
ACC
氧化酶和
ACC
合成酶是番茄细胞内合成乙烯的两个关键酶。利用反义
DNA
技术
(
原理如图
1)
,可以抑制这两个基因的表达,从而使番茄具有耐储存、
宜运输
的优点。图
为融合
ACC
氧化酶基因和
ACC
合成酶基因的反义基因表达载体的结构示意图。

1.图2中的2Al1为特异性启动子,则2Al1应在番茄的(填器官名称)中表达。
2.从番茄成熟果实中提取作为模板,利用反转录法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因,以进行拼接构成融合基因并扩增。
3.合成出的ACC氧化酶基因两端分别含限制酶
Bam
HI和
Xba
I的酶切位点,ACC合成酶基因两端含SacI和
Xba
I的酶切位点,用限制酶对上述两个基因进行酶切,再串联成融合基因,相应的Ti质粒应用限制酶进行切割,确保融合基因能够插入载体中。
4.为了实现图1中反义基因的效果,应将融合基因(填“正向”或“反向”)插入启动子2Al1的下游即可构成反义融合基因。将表达载体与农杆菌菌液混合后,接种在含有的培养基中,可筛选出含有反义融合基因的农杆菌,再利用农杆菌转化法获得转基因番茄。
5.在检测番茄细胞中是否存在反义融合基因时,(填“能”或“不能”)用放射性物质标记的ACC氧化(合成)酶基因片段作探针进行检测,理由是。

※题型:读图填空题※知识点:读图填空题※试题难度:中等
环境雌激素(
E
Es
)严重危害动物和人类的健康。幼年斑马鱼的卵黄蛋白原基因(
Z
基因)在正常情况下不表达,在
E
E
s
的诱导下可表达
且表达
水平和
EEs
的浓度呈正相关。为了简便直观地检测水体环境中
EEs
污染情况,研究人员培育了

种转基因斑马鱼,部分过程如下。

请回答
:
1.启动子的作用是。为了获得Z基因的启动子,应从斑马鱼的填“基因组文库”或“cDNA文库”)中获取。
2.对Z基因启动子进行扩增前,应设计合适的引物,使扩增后的DNA片段中含有位点,以便Z基因启动子能定向插入原始质粒的正确位置。
3.获得的重组质粒可通过显微注射法导入斑马鱼中。为鉴定是否成功导入,应选择含有(填“Z“或“EGFP”)基因的DNA片段作为探针进行检测,理由是。4.
选取成功导入重组质粒的斑马鱼均分为两组,
分别在含
EEs
、不含
EEs
的环境中培养。一段时间后检测相关基因的表达情况,结果如下。

培养条件
Z
基因
E
GFP
基因

E
Es
+
+


E
Es
-
-

注:“
+
”表示相关基因表达,“
-
”表示相关基因未表达。
依据上述结果,说出利用转基因斑马鱼简便直观地检测水体环境中
EEs
污染的原理
:


※题型:读图填空题※知识点:读图填空题※试题难度:中等
核酸疫苗是将编码某种抗原蛋白的外源基因(
DNA

RNA
片段)导人动物体细胞内,通过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到预防或治疗相应疾病的一类新型疫苗。研究表明核酸疫苗不仅具有良好的免疫原性与安全性,且由于核酸更易于修饰与改造,较以往蛋白疫苗具有更大的灵活性和更广阔的应用前景。请回答:
1.研发DNA疫苗时,构建含有病原体抗原基因表达载体的过程中需要用到的工具酶有。构建基因表达载体的目的是,基因表达载体中,驱动病原体抗原基因转录的结构为。
2.mRNA疫苗可以由计算机设计、制造并通过高速机器大批量生产。目前用于制造疫苗的RNA有两种,非复制型mRNA和自我扩增型mRNA,从图中可以看出自我扩增型mRNA的优点是可在细胞内。mRNA常被包裹在脂质体颗粒中注射到相关人员的手臂肌肉,脂质体颗粒的作用是。
style="VERTICAL-ALIGN:middle">3.病毒核酸检测试剂盒通常以病毒独特的基因序列为检测靶标。PCR扩增时每一个循环分为三步,使靶标DNA序列呈指数增加。每一个扩增出来的DNA序列都与预先加入的一段荧光标记结合,产生荧光信号,扩增出来的靶标DNA序列越多,累积的荧光信号就越强。在没有病毒的样本中,因为没有靶标DNA序列扩增,所以就检测不到荧光信号。

※题型:读图填空题※知识点:读图填空题※试题难度:中等
【生物——选修
:现代生物科技专题】
下表为部分限制酶的识别序列及切割位点,下图为基因工程中构建重组质粒的过程示意图。请回答下列问题:
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