※题型：读图填空题※知识点：读图填空题※试题难度：较难
为生产具有特定性能的
α-
淀粉酶
研究人员从某种海洋细菌中克隆了
α-
淀粉酶基因
(1
656
个碱基对
),
利用基因工程大量制备淀粉酶
实验流程如图。请回答下列问题
:
1.利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前,需先获得细菌的。
2.为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接,需在引物的端加上限制性酶切位点,且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点,主要目的是。
3.进行扩增时,反应的温度和时间需根据具体情况进行设定,下列选项中的设定与引物有关,的设定与扩增片段的长度有关。(填序号)
①变性温度 ②退火温度 ③延伸温度 ④变性时间 ⑤退火时间 ⑥延伸时间4.如图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列:
style="VERTICAL-ALIGN:middle">图中虚线框内mRNA片段包含个密码子,如虚线框后的序列未知,预测虚线框后的第一个密码子最多有种。5.获得工程菌表达的α-淀粉酶后,为探究影响酶活性的因素,以浓度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性,结果如表所示:
|
缓冲液
50mmol/LNa2HPO4-KH2PO4
50mmol/LTris-HCI
50mmol/LGly-NaOH
pH
6.0
6.5
7.0
7.5
7.5
8.0
8.5
9.0
9.0
9.5
10.0
10.5
酶相对活性%
25.4
40.2
49.8
63.2
70.1
95.5
99.5
85.3
68.1
63.7
41.5
20.8
根据上述实验结果,初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为。
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※题型：读图填空题※知识点：读图填空题※试题难度：中等
某基因砑究院培育出了转基因克隆绵羊,该绵羊能合成深海鱼体内富含的不饱和脂肪酸omega—3。1.在培育转基因克隆绵羊过程中,运用方法除去的卵母细胞的细胞核,通过化学试剂使该细胞与供体细胞融合,进而构建重组胚胎。
2.为保证释胎移植顺利进行,需要在合适的季节对供、受体母羊进行处理,培育过程中,科研人员同时将omega—3合成酶的基因片段转移到了该羊基因组中,使目的基因进入受体细胞并维持稳定和表达的过程,称为。利用PCR技术进行扩增目的基因的前提是。
3.目前,人们主要通过食用深海鱼肉摄取omega—3,人们过度捕杀深海鱼而严重破坏了海洋生态系统,使生态系统的稳定性下降。
4.建造海底人工鱼礁,其目的是改善海洋环境,是实现海洋渔业可持续发展的举措之一,这体现了生态工程所遵循的原理。十九大提出“绿水青山就是金山银山”,要实现这一目标不仅需要对破坏的生态环境进行恢复,还要考虑当地人的经济发展和生活需要,这主要遵循了生态工程的原理。
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