案例2 探究影响酶活性的因素 学 时 1学时。 目的要求 探究不同温度和pH对过氧化氢酶活性的影响。 实验原理 鲜肝提取液中含有过氧化氢酶,过氧化氢酶催化H2O2分解的效率相当于Fe3+的500万倍。过氧化氢酶的最适温度为37℃,最适pH为7~7.3,不同温度和pH影响酶的活性。 材料器具 鲜肝提取液、3%H2O2溶液;缓冲液、冰块;pH试纸、试管、玻璃棒、移液管、培养皿、橡皮塞、试管架、试管刷、定性滤纸、解剖剪、镊子。 活动程序 ⒈探究低温对酶活性的影响 ⑴鲜肝液煮熟后即不能催化H2O2的分解,据此可知高温使酶失活,从而联想低温是否影响酶活性,并作出假设。 ⑵设计一个探究温度影响过氧化氢酶活性的实验,方案中要设置对照。设计并绘制数据记录表。 ⑶课前的实验准备工作主要是用鲜肝提取液和定性滤纸制作若干同样大小的过氧化氢酶滤纸片。 ⑷按照确认的实验方案操作,观察H2O2酶滤纸片周围产生的氧气泡大小和数量,将实验结果记录在数据表格中。 ⑸分析实验结果是否支持假设。 ⒉探究pH对酶活性的影响 ⑴根据消化液的pH与消化酶的关系,产生探索不同pH是否影响过氧化氢酶活性的联想,并作出有关pH与酶活性的假设。 ⑵对照血浆pH(7.35~7.45),推测肝细胞内过氧化氢酶的酸碱环境,设计一组探究实验方案。设计并绘制数据记录表。 ⑶实验准备工作主要是用0.067mol/L Na2HPO4溶液和0.067mol/L KH2PO4溶液,参照下表配制pH分别为 5、6、7、8的缓冲溶液。 pH | 5 | 6 | 7 | 8 | 0.067mol/L Na2HPO4(mL) | 1 | 20 | 60 | 95 | 0.067mol/L KH2PO4(mL) | 99 | 80 | 40 | 5 |
⑷按照本组设计的实验方案操作。观察H2O2酶滤纸片周围产生气泡的情况,将实验结果记录在数据表格中。 ⑸分析实验结果并得出结论。 ⑹讨论:是否需要为实验装置提供适宜的温度条件? |