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【答案】 高温灭菌 无菌 用无菌棉棒擦取消毒筷后在乙培养基上轻轻涂抹 培养 增加一组灭菌后不进行接种的培养基作为对照
【解析】细菌和真菌的生活需要一定的条件，如水分、适宜的温度、还有有机物。因此首先要配制含有营养物质的培养基，可以用牛肉汁加琼脂熬制，然后把培养基和所有用具进行高温灭菌，以防杂菌对实验的干扰，为防止高温杀死细菌、真菌，要等冷却后，再进行接种，接种后放在温暖的培养箱中进行恒温培养。
（1）配制含细菌所需要的各种成分的培养基。
（2）为了防止杂菌对实验的影响，将培养基进行高温灭菌处理，并标号为甲和乙。
（3）本实验的唯一变量是一次性筷子或消毒筷。因此用无菌棉棒擦取一次性筷子后在甲培养基上轻轻涂抹，一次性筷子上的细菌真菌就接种到培养基上了；然后用无菌棉棒擦取消毒筷后在乙培养基上轻轻涂抹。
（4）将两个培养皿放入恒温箱进行培养。
（5）定时进行观察，并作记录。
（6）推测实验结果：相同时间后，甲培养皿中的培养基表面出现大量菌落，而乙培养基表面菌落较少。
（7）要想使该实验设计更加合理，应排除培养基上原有细菌、真菌对实验的影响，因此应该增加一组灭菌后不进行接种的培养基作为对照。
B. 
D. 
