蛋白质沉淀反应—蛋白质的盐析作用
<p>【实验原理】</p><p>盐析现象是指—般蛋白质在高浓度盐溶液中溶解度下降，故向其溶液中加入中性盐至一定浓度时，蛋白质即自溶液中沉淀析出。盐析作用与两种因素有关：</p><p>①蛋白质分子被浓盐脱水;</p><p>②分子所带电荷被中和。</p><p>蛋白质的盐析作用是可逆过程，用盐析方法沉淀蛋白质时，较少引起蛋白质变性，经透析或用水稀释时又可溶解。</p><p>盐析不同的蛋白质所需中性盐浓度与蛋白质种类及pH有关。分子量大的蛋白质(如球蛋白)比分子量小的(如清蛋白)易于析出。球蛋白在半饱和硫酸铵溶液中即可析出，而清蛋白需在饱和硫酸铵溶液中才能析出。</p><p>【 试剂 】</p><p>1.鸡蛋清的氯化钠溶液(一份鸡蛋清加10份的0.9%氯化钠溶液)</p><p>2.固体硫酸铵</p><p>3.10%氢氧化钠溶液</p><p>4..1%硫酸铜溶液</p><p>【实验操作】</p><p>1.取鸡蛋清氯化钠溶液约2ml于 试管 中，加入硫酸铵粉末，至硫酸铵饱和不再溶解为止，此时溶液颜色为乳白色，用滤纸过滤。</p><p>2.取滤液做双缩脲反应，检查滤液中有无蛋白质存在。</p><p>蛋白质沉淀用1ml 蒸馏 水溶解后作双缩脲反应，证明盐析的蛋白质重新溶解于水而未引起变性。试管编号2023567</p><p>磷酸溶液的浓度(mol/L)202320232</p><p>磷酸溶液的加入量(滴)1 1 1 2023</p><p>混合溶液的PH值543.532.521.5</p><p>盐析时(NH4)2SO4</p><p>饱和溶液的用量(滴)20232023</p>
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