meili 发表于 2022-10-27 11:04:18

鉴定转录因子与启动子结合的方法和原理

<p>问题:鉴定转录因子与启动子结合的方法和原理
<p>答案:↓↓↓<p class="nav-title mt10" style="border-top:1px solid #ccc;padding-top: 10px;">姜仁富的回答:<div class="content-b">网友采纳  一般有体外和体内两种较为常用的方法:  体外:用EMSA  通常将纯化的蛋白和32P同位素标记的DNA探针(取promoter部分)一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针.DNA-复合物比非结合的探针移动得慢.然后再放射自显影的仪器上就可以看到条带,如果条带移动得慢,就是有结合.  体内:报告基因方法  就是将你想要检测的promoter装在一个载体上,然后导入特定的细胞内.该细胞内有表达或者过表达你所想检测的转录因子.如果转录因子可以结合在你的promoter上,就可以启动下游的报告基因表达.报告基因可以是荧光蛋白,也可以是荧光素酶.  注:promoter--启动子.其实enhancer也可以用来当promoter.
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