meili 发表于 2022-10-27 11:01:27

如表是几种限制梅识别序列及其切割位点,(图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中侧位点先同的酶不重复标注.请回答下列问题:限制酶BamHIBclISau3AIHindIII识别

<p>问题:如表是几种限制梅识别序列及其切割位点,(图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点,其中侧位点先同的酶不重复标注.请回答下列问题:限制酶BamHIBclISau3AIHindIII识别
<p>答案:↓↓↓<p class="nav-title mt10" style="border-top:1px solid #ccc;padding-top: 10px;">陈应麟的回答:<div class="content-b">网友采纳  (1)启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位.标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因(以便筛选出含有目的基因的细胞).  (2)目的基因两侧有限制酶BclI、BamHⅠ、HindIII和Sau3A I的切割位点,若用限制酶BamHⅠ或Sau3A I切割会破坏质粒上两种抗性基因,因此用图中质粒和目的基因构建重组DNA时,应选用BclI和HindIII两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过DNA连接酶作用后获得重组质粒.将目的基因导入微生物细胞时常有感受态细胞法,即先用Ca2+(或CaCl2)处理细胞,使其处于一种能吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞.  (3)基因表达载体的组成除了图中的启动子、标记基因(抗生素抗性基因)外,还有终止子和目的基因.  (4)由于选用BclI和HindIII两种限制酶构建基因表达载体时,破坏了氨苄青霉素抗性基因,但没有破坏四环素抗性基因,因此切割构建为了筛选出转入重组质粒的大肠杆菌,应在选择培养基中添加四环素.由于限制酶BclI、BamHⅠ、HindIII的识别序列都能被Sau3k I识别,因此用Sau3k I切图质粒最多可能获得7种大小不同的DNA片段.  故答案为:  (1)RNA聚合酶 鉴别受体细胞中是否含有目的基因(以便筛选出含有目的基因的细胞)  (2)BclI和HindIII DNA连接酶Ca2+(或CaCl2)  (3)终止子  (4)四环素 7
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