meili 发表于 2022-10-27 10:56:40

电泳DNA时,拖尾现象很严重,造成这种现象的原因有哪些?

<p>问题:电泳DNA时,拖尾现象很严重,造成这种现象的原因有哪些?
<p>答案:↓↓↓<p class="nav-title mt10" style="border-top:1px solid #ccc;padding-top: 10px;">顾力栩的回答:<div class="content-b">网友采纳  电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑:  1、PCR产物自身原因:  往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物过多.  对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度.④增加模板量,减少引物的用量,减少循环次数,提高退火温度.  2、电泳体系的问题:  (1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液.(2)上样时样品漂了,建议增加上样缓冲液的用量,以及小心加样.(3)电压太高.(4)适当把你的胶的浓度加大.(根据你的片断大小而定)(5)观察你的marker是否也存在拖尾现象,作为对照.
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