【RNA是如何反转录成cDNA的?过程和原理怎样?我做反转录的操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水,65C反应10min,冰上放置5min后,再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆转录酶,反应25℃10min,37℃60min,70℃10min.我想】
<p>问题:【RNA是如何反转录成cDNA的?过程和原理怎样?我做反转录的操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水,65C反应10min,冰上放置5min后,再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆转录酶,反应25℃10min,37℃60min,70℃10min.我想】<p>答案:↓↓↓<p class="nav-title mt10" style="border-top:1px solid #ccc;padding-top: 10px;">林庆华的回答:<div class="content-b">网友采纳 操作步骤是先加RNA、OligodT、随即引物、水 65C反应10min,冰上放置5min后:这一步是让RNA变性,把RNA的二级结构打开; 再加dNTP,RNaseA,BUFFER,MTV逆转录酶, 反应25℃10min:这一步是让反转录引物(oligodT,随机引物)和模板RNA退火结合 37℃60min:这一步是反转录酶的工作温度 70℃10min:这一步是变性,把合成的cDNA和RNA变性开,就拿到单链的cDNA
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